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四川地区一株锦鲤疱疹病毒的分离鉴定及系统进化分析
引用本文:陈俊杰,李媛媛,阳瑞雪,汪开毓,耿 毅,陈德芳,黄小丽,欧阳萍. 四川地区一株锦鲤疱疹病毒的分离鉴定及系统进化分析[J]. 水产学报, 2018, 42(1): 141-148
作者姓名:陈俊杰  李媛媛  阳瑞雪  汪开毓  耿 毅  陈德芳  黄小丽  欧阳萍
作者单位:四川农业大学动物医学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物医学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物医学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物医学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物医学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物科技学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物科技学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物医学院, 四川 成都 611130
基金项目:中国博士后科学基金(2015M582563);教育部留学回国人员科研启动基金(教外司留[2015]311号)
摘    要:2015年5月,四川某鲤养殖场暴发一种传染性疾病,导致鲤大面积死亡,死亡率高达80%。为研究此次疾病病因和流行规律,将病料进行解剖、细菌学检查、病理组织观察、PCR鉴定、病毒分离和系统进化分析。结果显示,发病鱼眼球凹陷,胸鳍及腹鳍出现出血斑,病鱼鳃严重坏死,肾脏肿大。细菌检查为阴性。组织病理学观察,病变最明显的是鳃和肾脏。病鱼鳃丝血管扩张充血,鳃小片呼吸上皮细胞肿胀、脱落。鳃丝基部的上皮细胞大量增生,层次增多。肾小管上皮细胞组织结构紊乱,细胞肿胀,管腔变狭小,有崩裂和坏死现象。提取病鱼的肾脏和鳃组织DNA为模板,针对世界动物卫生组织(OIE)推荐的检测锦鲤疱疹病毒(KHV)的Sph基因进行PCR检测,出现特异性扩增产物。将病鱼的肾脏和肝脏组织研磨过滤灭菌后,腹腔注射20尾健康鲤,实验组表现为急性死亡(累积死亡率为90%),出现与自然发病鱼相同的症状。将组织匀浆接种到普通鲤脑细胞系(CCB),盲传3代后可稳定地观察到典型的细胞病变。细胞培养物染色超薄切片电镜观察结果显示,病毒为有囊膜的球状,病毒粒子直径为180~200 nm。对分离株的TK基因全长序列进行系统发育分析,证实该毒株属于KHV亚洲1型毒株。本研究首次报道我国西南地区养殖鲤中KHV感染引起大面积死亡,为KHV起源进化、分类以及疾病诊断和防控提供重要依据。

关 键 词:  锦鲤疱疹病毒  鲤疱疹病毒III型(CyHV-3)  病毒分离鉴定  系统进化分析
收稿时间:2016-12-21
修稿时间:2017-04-06

Isolation and identification of a Koi Herpesvirus and phylogenetic analysis from Sichuan Province
CHEN Jun-jie,LI Yuan-yuan,YANG Rui-xue,WANG Kai-yu,GENG Yi,CHEN De-fang,HUANG Xiao-li and OUYANG Ping. Isolation and identification of a Koi Herpesvirus and phylogenetic analysis from Sichuan Province[J]. Journal of Fisheries of China, 2018, 42(1): 141-148
Authors:CHEN Jun-jie  LI Yuan-yuan  YANG Rui-xue  WANG Kai-yu  GENG Yi  CHEN De-fang  HUANG Xiao-li  OUYANG Ping
Affiliation:College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Animal Science and Technology, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Animal Science and Technology, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China and College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China
Abstract:
Keywords:Cyprinus carpio  koi herpesvirus (KHV)  cyprinid herpesvirus 3 (CyHV-3)  virus isolation and identification  phylogenetic analysis
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