| 柑橘溃疡病菌的普通LAMP及快速LAMP检测方法的建立 |
| |
| 引用本文： | 张仑,殷幼平,吴瑜佳,王中康. 柑橘溃疡病菌的普通LAMP及快速LAMP检测方法的建立[J]. 植物保护, 2013, 39(3): 91-95 |
| |
| 作者姓名： | 张仑 殷幼平 吴瑜佳 王中康 |
| |
| 作者单位： | 重庆大学生物工程学院,基因工程研究中心,重庆400030 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，公益性行业(农业)科研专项 |
| |
| 摘 要： | 建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP和快速LAMP检测方法,使其能应用于基层检验检疫部门对病害的快速检测.利用柑橘溃疡病菌基因组特有的保守区域设计LAMP引物,通过优化反应条件,建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP检测体系；在普通LAMP引物的基础上设计一对环引物,建立柑橘溃疡病菌的快速LAMP检测体系,并以多种参比菌DNA以及健康柑橘叶片基因组DNA为模板对普通LAMP和快速LAMP检测体系的特异性进行了验证,利用柑橘溃疡病菌菌液和DNA溶液梯度稀释液对普通LAMP和快速LAMP检测体系的灵敏度进行了验证.普通LAMP检测体系菌体和DNA检测灵敏度分别达到了2.25×104 cfu和2.03×10-1 ng,快速LAMP检测体系菌体和DNA检测灵敏度分别达到了2.25 cfu和2.03×10-5ng.在特异性测试中,普通LAMP检测体系与快速LAMP检测体系均仅对柑橘溃疡病菌进行扩增,对非靶标菌和柑橘叶片基因组DNA不产生扩增,普通LAMP与快速LAMP检测体系特异性测试结果一致.快速LAMP检测体系在0.5h内就可以达到普通LAMP检测体系的扩增量,是普通LAMP检测体系反应时间的一半,大大提高了检测的效率；快速LAMP检测体系菌悬液和DNA检测灵敏度均比普通LAMP检测体系提高了10 000倍.成功地建立了柑橘溃疡病菌的普通LAMP及快速LAMP检测方法,为柑橘溃疡病菌的检测提供了一种新的简便、快速的检测手段.
|
| 关 键 词： | 柑橘溃疡病菌 环介导等温扩增 LAMP 检疫 |
| 收稿时间： | 2014-12-17 |
| 修稿时间： | 2015-03-09 |
Regular LAMP and fast LAMP for the detection of Xanthomonas axonopodis pv.citri |
| |
| Zhang Lun,Yin Youping,Wu Yuji,Wang Zhongkang. Regular LAMP and fast LAMP for the detection of Xanthomonas axonopodis pv.citri[J]. Plant Protection, 2013, 39(3): 91-95 |
| |
| Authors: | Zhang Lun Yin Youping Wu Yuji Wang Zhongkang |
| |
| Affiliation: | Gene Center, College of Bioengineering, Chongqing University, Chongqing400030, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Xanthomonas axonopodis pv. citri loop mediated isothermal amplification LAMP quarantine |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《植物保护》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《植物保护》下载全文 |
|
