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禽呼肠孤病毒P17蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其ELISA检测方法的建立
引用本文:谢芝勋 秦春香 谢丽基. 禽呼肠孤病毒P17蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其ELISA检测方法的建立[J]. 中国兽医科技, 2007, 37(9): 777-782
作者姓名:谢芝勋 秦春香 谢丽基
作者单位:[1]广西兽医研究所,广西南宁530001 [2]广西大学动物科技学院,广西南宁530003
基金项目:广西留学回国人员基金项目(桂科回0144014和0342006);广西科技攻关计划项目(023500124)
摘    要:用设计合成的1对跨越禽呼肠孤病毒(ARV)P17非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物,对ARVS1133株进行了RT-PCR扩增。扩增产物与pGEX-4T-1原核表达载体连接后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。经0.2mmol/LIPTG诱导,表达的融合蛋白分子质量为42.4ku,占茵体总蛋白的34%。表达产物P17蛋白经不同浓度尿素纯化后,纯度达到85%。Western-blotting显示,纯化的P17蛋白能与感染ARV的阳性血清反应,说明其具有抗原性。以此重组蛋白为包被抗原初步建立了用于鉴别检测ARV活病毒感染与灭活疫苗免疫的SPF鸡血清的ELISA。

关 键 词:禽呼肠孤病毒 P17非结构蛋白 原核表达 酶联免疫吸附试验
文章编号:1673-4696(2007)09-0777-06
收稿时间:2007-02-01
修稿时间:2007-04-20

Expression of P17 protein gene of and establishment of an ELISA avian reovirus in Escherichia coli assay for detection of the virus
XIE Zhi-xun, QIN Chun-xiang, XIE Li-ji. Expression of P17 protein gene of and establishment of an ELISA avian reovirus in Escherichia coli assay for detection of the virus[J]. Chinese Journal of Veterinary Science and Technology, 2007, 37(9): 777-782
Authors:XIE Zhi-xun   QIN Chun-xiang   XIE Li-ji
Abstract:
Keywords:avian reovirus  nonstructural protein P17  prokaryotic expression   ELISA
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