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正交设计优化辣椒SRAP-PCR反应体系及引物筛选
引用本文:周坤华,方荣,陈学军,缪南生,王悟亮.正交设计优化辣椒SRAP-PCR反应体系及引物筛选[J].江西农业大学学报,2010,32(3).
作者姓名:周坤华  方荣  陈学军  缪南生  王悟亮
作者单位:1. 江西省农业科学院,蔬菜花卉研究所,江西,南昌,330200;江西省农业科学院,油料作物重点实验室,江西,南昌,330200
2. 江西省农业科学院,蔬菜花卉研究所,江西,南昌,330200
3. 江西省农业科学院,江西,南昌,330200
基金项目:国家自然科学基金,江西省农科院创新基金 
摘    要:以辣椒基因组DNA为模板,采用L16(45)正交试验设计,对SRAP反应体系中的5种关键因素(Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA)进行优化,结果表明,辣椒SRAP-PCR最佳反应体系为:Taq DNA 聚合酶0.75 U、Mg2+ 0.6 mmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.8 μmol/L、模板DNA 50 ng,总体积为10 μL.运用该体系对辣椒3份种质材料进行验证,证明该体系稳定可靠,并从198个SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的35个引物组合.该体系的建立与多态性引物组合的筛选为SRAP标记技术在辣椒分子遗传学中的应用提供科学依据.

关 键 词:辣椒  正交设计  体系优化  引物筛选

Optimization of SRAP- PCR System in Pepper Using Orthogonal Design and Selection of Primers
ZHOU Kun-hua,FANG Rong,CHEN Xue-jun,MIAO Nan-sheng,WANG Wu-liang.Optimization of SRAP- PCR System in Pepper Using Orthogonal Design and Selection of Primers[J].Acta Agriculturae Universitis Jiangxiensis,2010,32(3).
Authors:ZHOU Kun-hua  FANG Rong  CHEN Xue-jun  MIAO Nan-sheng  WANG Wu-liang
Abstract:
Keywords:SRAP
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