山羊乳腺上皮细胞单细胞克隆的制备与鉴定

本研究旨在探索乳腺上皮细胞单细胞克隆制备的实际操作的可能性，并对其生物学特性进行鉴定。本试验从泌乳中期的徐淮山羊乳腺提取乳腺上皮细胞，纯化传至第3代，采用三种不同的方法（口吸管法、细胞稀释法以及克隆环法）将细胞接种至96孔板，采用细胞形态学与免疫组化鉴定。结果显示：口吸管法克隆形成率为0，克隆环法克隆形成率为59％，细胞稀释法克隆形成率为3．5％。克隆环法细胞克隆率最高，但是操作很难熟练进行，易导致克隆细胞的不纯。细胞稀释法操作简单易行，对细胞伤害小，克隆率较高。细胞形态学与细胞角蛋白18鉴定为乳腺腺泡上皮细胞。