鹅α干扰素基因在COS-7细胞中的瞬时表达及抗病毒功能初探 |
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引用本文: | 刘菲,唐卫杰,程安春,汪铭书,赵婷婷,高丽芹.鹅α干扰素基因在COS-7细胞中的瞬时表达及抗病毒功能初探[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2011,37(4). |
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作者姓名: | 刘菲 唐卫杰 程安春 汪铭书 赵婷婷 高丽芹 |
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作者单位: | 1. 四川农业大学动物医学院,四川雅安625014;四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014 2. 四川农业大学动物医学院,四川雅安,625014 |
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基金项目: | 四川省教育厅重点资助项目,教育部“长江学者和创新团队发展计划”创新团队资助项目,现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目 |
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摘 要: | 为了研究鹅α干扰素( goIFN-α)基因的特性和功能,将天府肉鹅的α干扰素基因克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体上,构建重组质粒pcDNA3.1-goIFN-α,脂质体介导将其转入COS-7细胞中;应用间接免疫荧光、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和免疫印迹(Western-blot)法检测goIFN-α基因在COS-7细胞中的转录和表达情况,并对COS-7细胞表达上清液进行抗病毒活性检测.结果表明:目的蛋白在转染12 h后就可以被检测出,36 h前目的蛋白在上清液中快速增加,之后增加速度变慢;重组质粒能够在COS-7细胞内得到高效表达,表达的蛋白分子质量为38ku,比预测的分子质量(约21 ku)大;间接免疫荧光显示,细胞内出现黄绿色荧光,胞核附近最亮;表达产物经细胞病变抑制法测定,显示出具有明显的抗猪水泡性口炎病毒(VSV)及小鹅瘟病毒(GPV)的活性.
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关 键 词: | 鹅α干扰素 COS-7细胞 免疫印迹 间接免疫荧光 细胞病变抑制法 |
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