| 块根紫金牛ISSR-PCR反应体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 陈宗游,史艳财,罗宝丽,邹蓉,孔德鑫,韦霄. 块根紫金牛ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J]. 种子, 2011, 30(7) |
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| 作者姓名： | 陈宗游 史艳财 罗宝丽 邹蓉 孔德鑫 韦霄 |
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| 作者单位： | 1. 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林,541006
2. 广西师范大学生命科学院,广西桂林,541004 |
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| 基金项目： | 广西科技攻关项目，广西植物研究所基本业务费合同，广西科技创新能力建设项目 |
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| 摘 要： | 采用正交和单因素试验设计方法,研究Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、退火温度及循环次数对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立块根紫金牛ISSR-PCR反应体系和扩增程序,即25 ul的体系中含Mg2+ 2.0 mmol/L,dNTP0.15 mmol/L,引物1.0μmol/L,TaqDNA聚合酶1.0U,模板DNA50ng,10×Buffer 2.5μl.适宜的扩增程序是94℃预变性5 min,94℃变性30s,56.6℃退火45s,70℃延伸2.0 min;45个循环；72℃延伸7min,4℃保存.采用正交和单因素试验可快速建立ISSR-PCR反应体系.该体系稳定、可靠,可用于块根紫金牛遗传多样性分析.
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| 关 键 词： | 块根紫金牛 ISSR-PCR 正交设计 单因素试验 优化 |
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Ardisia pseudocrispa |
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| CHEN Zong-you,SHI Yan-cai,LUO Bao-li,ZOU Rong,KONG De-xin,WEI Xiao. Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Ardisia pseudocrispa[J]. Seed, 2011, 30(7) |
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| Authors: | CHEN Zong-you SHI Yan-cai LUO Bao-li ZOU Rong KONG De-xin WEI Xiao |
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| Affiliation: | CHEN Zong-you1,SHI Yan-cai1,LUO Bao-li2,ZOU Rong1,KONG De-xin,WEI Xiao1 |
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