| 转mCherry基因水稻的遗传分析及T-DNA整合位点的研究 |
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| 引用本文： | 李亚丽,刘中来,周洁,徐国娟,瞿绍洪.转mCherry基因水稻的遗传分析及T-DNA整合位点的研究[J].分子植物育种,2012(2):121-130. |
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| 作者姓名： | 李亚丽 刘中来 周洁 徐国娟 瞿绍洪 |
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| 作者单位： | 浙江师范大学化学与生命科学学院;浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所 |
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| 基金项目： | 浙江省科技厅公益技术研究农业项目(2010R21A52D03);国家转基因生物新品种培育重大专项课题(2009-R21A14C01);浙江省农科院专项研究基金课题(2009R21Y04E01)共同资助 |
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| 摘 要： | 为了建立转基因水稻的高通量遗传分析系统,本研究以粳稻成熟胚诱导的愈伤组织为受体材料,潮霉素磷酸转移酶(HPT)为抗性筛选标记,通过农杆菌介导的方法将红色荧光蛋白基因mCherry导入水稻。在水稻转化愈伤组织、转化植株(T0)和转基因后代(T1)均检测到红色荧光,证实mCherry在转基因水稻中稳定表达。139个独立转化株系的遗传分析表明,mCherry在转基因后代表现多种遗传模式,54%的转基因株系呈单位点遗传。TAIL-PCR进一步验证转基因整合到水稻基因组。根据T-DNA整合位点DNA序列分析结果,T-DNA左边界发生碱基缺失、增加和替换,右边界只发生碱基缺失,说明左边界比右边界有更多的碱基变异类型。此外,对T2代植株mCherry和HPT的转录水平进行实时定量逆转录PCR分析,结果表明,mCherry和HPT转录水平因T-DNA在水稻基因组中的整合位置而变化,表现位置效应。本研究在mCherry荧光蛋白和其它相关方法的基础上,为转基因水稻遗传及分子分析建立了一个高效的流程体系。
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| 关 键 词： | 水稻 mCherry 转基因 T-DNA 整合位点 遗传分析 |
Genetic Analysis of mCherry Transgenic Rice and Molecular Characte-rization of T-DNA Integration Sites in the Rice Genome |
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| Li Yali,Liu Zhonglai,Zhou Jie,Xu Guojuan,Qu Shaohong.Genetic Analysis of mCherry Transgenic Rice and Molecular Characte-rization of T-DNA Integration Sites in the Rice Genome[J].Molecular Plant Breeding,2012(2):121-130. |
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| Authors: | Li Yali Liu Zhonglai Zhou Jie Xu Guojuan Qu Shaohong |
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| Institution: | 1 College of Chemistry and Life Sciences,Zhejiang Normal University,Jinhua,321004;2 Institute of Virology and Biotechnology,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,Hangzhou,310021 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rice mCherry Transgenic T-DNA Integration site Genetic analysis |
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