猪源凋亡相关基因SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法的建立 |
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引用本文: | 李玉明,王刚,汪志艳,刘永刚,涂亚斌,王淑杰,姜成刚,王延群,蔡雪辉.猪源凋亡相关基因SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法的建立[J].中国预防兽医学报,2013,35(5). |
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作者姓名: | 李玉明 王刚 汪志艳 刘永刚 涂亚斌 王淑杰 姜成刚 王延群 蔡雪辉 |
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作者单位: | 1. 东北农业大学,黑龙江哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心,黑龙江哈尔滨150001 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心,黑龙江哈尔滨,150001 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年科学基金,中国农业科学院基本科研业务费 |
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摘 要: | 为检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的猪胸腺中凋亡相关因子的变化,本研究针对猪TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因及内参β-actin基因设计特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因的SYBR Green Ⅰ qRT-PCR方法.结果显示,该方法线性关系好(R2≥0.998),敏感性高,初始模板的检出下限为10拷贝/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,批内、批间重复试验的变异系数均小于3%,具有良好的重复性.本研究为细胞凋亡相关因子变化趋势的研究提供方法.
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关 键 词: | 猪 凋亡相关基因 荧光定量PCR SYBR Green Ⅰ |
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