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| 鸡氨肽酶N蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究 | |
| 引用本文： | 李广兴,李兰兰,潘龙,洪琴,张恒,杨巍,黄小丹,马德星,张瑞莉,杨贵君. 鸡氨肽酶N蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究[J]. 东北农业大学学报, 2015, 0(2) |
| 作者姓名： | 李广兴 李兰兰 潘龙 洪琴 张恒 杨巍 黄小丹 马德星 张瑞莉 杨贵君 |
| 作者单位： | 1. 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030 2. 东北农业大学动物医学学院，哈尔滨 150030; 上海药明康德新药开发有限公司生物部，上海 200131 3. 东北农业大学动物医学学院，哈尔滨 150030; 山东信得科技股份有限公司，山东 潍坊 262200 4. 东北农业大学动物医学学院，哈尔滨 150030; 黑龙江职业学院，哈尔滨 150080 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31172295，31272569)；黑龙江省自然科学基金项目 |
| 摘 要： | 试验参考Gen Bank上鸡氨肽酶N(g APN)基因序列(登录号为NM_204861.1)设计多对特异性引物,利用RT-PCR分段克隆g APN基因各段克隆产物并利用SOE-PCR将其进行连接,得到大小为2 906 bp的全长基因。利用原核表达载体p ET-30a(+)构建重组质粒p ET-g APN并转化E.coli Rosetta,经诱导表达得到大小为113 ku目的条带。以纯化g APN重组蛋白为免疫原制备兔抗g APN多克隆抗体,间接Elisa方法检测多抗血清效价为215。Western Blot试验证明,此多克隆抗体可以与原核表达的蛋白产生特异性条带,同时与18日龄鸡肾组织中获得的天然g APN蛋白样品有良好的反应性。间接免疫荧光试验显示,多克隆抗体可检测到pc DNA-g APN转染HELA细胞所表达的g APN蛋白。上述结果可为g APN蛋白的深入研究奠定基础。 |
| 关 键 词： | 鸡氨肽酶N 多克隆抗体 免疫印迹 间接免疫荧光 |
Preparation of polyclonal antibody against chicken amino peptidase N protein and its biological functions |
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| LI Guangxing,LI Lanlan,PAN Long,HONG Qin,ZHANG Heng,YANG Wei,HUANG Xiaodan,MA Dexing,ZHANG Ruili,YANG Guijun. Preparation of polyclonal antibody against chicken amino peptidase N protein and its biological functions[J]. Journal of Northeast Agricultural University, 2015, 0(2) | |
| Authors: | LI Guangxing LI Lanlan PAN Long HONG Qin ZHANG Heng YANG Wei HUANG Xiaodan MA Dexing ZHANG Ruili YANG Guijun |
| Abstract: | |
| Keywords: | chicken amino peptidase N polyclonal antiserum Western Blot indirect fluore-scence antibody assay |
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