牛支原体贵州株黏附相关蛋白的初步鉴定 |
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引用本文: | 罗小芬,谢晓东,赵超,胡茜,王永璇,冉芳菲,胡鹏飞,文明,朱二鹏,程振涛.牛支原体贵州株黏附相关蛋白的初步鉴定[J].畜牧兽医学报,2024(4):1672-1683. |
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作者姓名: | 罗小芬 谢晓东 赵超 胡茜 王永璇 冉芳菲 胡鹏飞 文明 朱二鹏 程振涛 |
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作者单位: | 1. 贵州大学动物科学学院;2. 盘州市动物疫病预防控制中心;3. 贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室 |
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基金项目: | 贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2021]一般161号;黔科合支撑[2023]一般077号);;贵州省优秀青年科技人才项目(黔科合平台人才[2021]5646号); |
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摘 要: | 牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)是引起牛乳腺炎和小牛肺炎等多种牛病的重要病原体。黏附蛋白通常被认为在该生物体的致病机制中起着核心作用。因此,本研究旨在以牛支原体株贵州株(GZ-2)的4个假定蛋白为研究对象,分别命名为M27、M32、M498、M663;分别在大肠杆菌感受态细胞DE3(BL21)中进行原核表达及纯化、亚细胞定位及黏附性研究。结果显示:成功表达和纯化重组M27、M32、M498和M663蛋白;M27、M32和M498蛋白均在牛支原体总蛋白、胞膜蛋白与胞质蛋白中均出现特异印迹条带,而M663未被检测到;共聚焦激光扫描显微镜下的免疫染色结果显示,M27、M32、M498和M663蛋白和牛支原体都能黏附在胚胎牛肺细胞(EBL)上,兔抗M27、M32、M498和M663血清抗体能够抑制蛋白M27、M32、M498和M663对EBL细胞的黏附,也能抑制牛支原体对EBL细胞的黏附。流式细胞术分析结果与其一致,得到了进一步证实。综上所述,M27、M32和M498蛋白是牛支原体的黏附相关蛋白,而M663在Western blot中未被检测到,但它仍能黏附在EBL...
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关 键 词: | 牛支原体 黏附蛋白 原核表达 筛选 |
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