基于Hsp70基因的绵羊肺炎支原体TaqMan检测方法的建立及其遗传演化分析 |
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引用本文: | 江锦秀,张靖鹏,林裕胜,刘维巍,胡奇林,万春和.基于Hsp70基因的绵羊肺炎支原体TaqMan检测方法的建立及其遗传演化分析[J].畜牧兽医学报,2024(4):1684-1695. |
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作者姓名: | 江锦秀 张靖鹏 林裕胜 刘维巍 胡奇林 万春和 |
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作者单位: | 1. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所;2. 福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) |
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基金项目: | 福建省科技计划项目(2020R1026009;2020J06029;2021R1026006;2023R1077); |
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摘 要: | 热休克蛋白70 (heat shock protein 70,Hsp70)是绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae, Movi)的重要膜蛋白,是机体内高度保守的生物分子,但在种间差异大,可作为分子生物学检测的候选靶区。为建立基于Hsp70基因的Movi通用型TaqMan实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法,并进一步了解其遗传变异情况,本研究基于GenBank中Movi的Hsp70基因特征,设计特异性的引物及探针,建立了基于Hsp70基因的绵羊肺炎支原体qPCR检测方法。应用建立的检测方法对88份山羊鼻拭子样品及43份疑似羊支原体性肺炎(Mycoplasmal pneumonia of sheep and goats, MPSG)病料进行检测。将检测结果为Movi阳性的肺组织样品进行分离鉴定,并对分离株Hsp70基因进行序列分析。结果显示,建立的qPCR检测方法其相关系数为1.00,扩增效率为96.0%,斜率为-3.411,Y轴截距为37.29。特异性强,与丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri, Mmc)、山羊支原...
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关 键 词: | 绵羊肺炎支原体 Hsp70基因 TaqMan实时荧光定量PCR方法 序列分析 |
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