| 共表达猪IFN-γ基因对PPV VP 2-PCV ORF2真核质粒的分子免疫佐剂效应研究 |
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| 引用本文： | 陈燕凌,徐志文,郭万柱,朱玲,徐凯,唐玉香.共表达猪IFN-γ基因对PPV VP 2-PCV ORF2真核质粒的分子免疫佐剂效应研究[J].畜牧兽医学报,2010,41(10). |
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| 作者姓名： | 陈燕凌 徐志文 郭万柱 朱玲 徐凯 唐玉香 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物生物技术中心,动物疫病与人类健康实验室,雅安,625014 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，四川省青年科技基金，四川省教育厅重点实验室项目，"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目 |
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| 摘 要： | 将干扰素-γ、猪圆环病毒Ⅱ型ORF2主要抗原表位(47-85位AA)和猪细小病毒VP2基因克隆至pCI-neo真核载体中,构建重组质粒pCI-IFN-γ.ORF2.VP2.用脂质体介导法将其转染到MDBK细胞中,利用RT-PCR和间接免疫荧光法检测产物的表达情况.将重组质粒pCI-IFN-γ.ORF2.VP2、pCI-ORF2.VP2、对照质粒pCI-neo、PBS、猪细小病毒火活苗和猪圆环病毒亚单位疫苗通过肌肉注射免疫小鼠,检测小鼠不同时期的淋巴细胞转化功能、T淋巴细胞亚群动态变化情况以及PPV、PCV2抗体水平.试验结果显示,在转染重组质粒的MDBK细胞中能扩增到ORF2-VP2和IFN-γ基因;转染后48 h用间接免疫荧光法能在荧光显微镜下观察到绿色荧光,检测到特异性蛋白的表达.pCI-IFN-γ.ORF2.VP2免疫组从第7天开始脾淋巴细胞对ConA有明显反应,显著高于对照组和PCI-ORF2.VP2免疫组;CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞的数量高于或显著高于对照组和pCI-ORF2.VP2免疫组;在免疫后第14天检测到PPV PCV抗体.结果表明,pCI-IFN-γ.ORF2.VP2能够有效诱导机体产生细胞免疫和体液免疫.
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| 关 键 词： | 猪细小病毒 VP2基因 猪圆环病毒 ORF2基因 IFN-γ基因 |
Co-expression of Porcine INF-γ Gene and Its Molecular Adjuvant Effects on the PPV VP2-PCV2 ORF2 Eukaryotic Plasmid |
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| CHEN Yan-ling,XU Zhi-wen,GUO Wan-zhu,ZHU Ling,XU Kai,TANG Yu-xiang.Co-expression of Porcine INF-γ Gene and Its Molecular Adjuvant Effects on the PPV VP2-PCV2 ORF2 Eukaryotic Plasmid[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2010,41(10). |
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| Authors: | CHEN Yan-ling XU Zhi-wen GUO Wan-zhu ZHU Ling XU Kai TANG Yu-xiang |
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