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蒌蒿DNA提取、RAPD优化及引物筛选初报
引用本文:李双梅,郭宏波,黄新芳,柯卫东. 蒌蒿DNA提取、RAPD优化及引物筛选初报[J]. 勤云标准版测试, 2006, 0(4)
作者姓名:李双梅  郭宏波  黄新芳  柯卫东
作者单位:湖北省武汉市蔬菜科学研究所 武汉430065
摘    要:为了能从分子水平探讨蒌蒿资源的遗传多样性、蒿属的系统分类和种质资源的鉴定,在此,报道采用小量法(SDS法)和大量法(CTAB法)提取蒌蒿DNA,建立优化的RAPD-PCR体系,并进行引物初步筛选。结果显示,两种抽提方法都可有效抽提出高质量的DNA,大量法得率要明显高于小量法,但小量法抽提的DNA也足够RAPD-PCR反应几十至上百次,不同的实验室可根据实验的需要进行选择。对两种方法抽提的DNA,都进行PCR扩增体系梯度摸索,最优的RAPD-PCR反应条件为:25μl反应体系中,含DNA模板约20ng,10×TaqDNA聚合酶缓冲液2.5μl,2μldNTPs(2.5mM),Mg2 2μl(25mM),TaqDNA聚合酶0.15μl(5U/μl),引物0.5μl(25μM),其余以双蒸水补充。在剔除了重复性差,条带模糊和单态的引物后,有九个引物表现稳定,扩增出来的条带清晰、多态性高。

关 键 词:蒌蒿  DNA提取  RAPD-PCR体系优化  引物筛选  ArtemisiaselengensisTurez.

DNA Isolation, Optimization for RAPD-PCR and Primers Screening ofArtemisia selengensis Turez.
Li Shuangmei,Guo Hongbo,Huang Xinfang,Ke Weidong. DNA Isolation, Optimization for RAPD-PCR and Primers Screening ofArtemisia selengensis Turez.[J]. , 2006, 0(4)
Authors:Li Shuangmei  Guo Hongbo  Huang Xinfang  Ke Weidong
Affiliation:(Wuhan Institute of Vegetable Science, wuhan, Hubei, 430065)
Abstract:
Keywords:Artemisia selengensis Turez   DNA isolation   Optimization for RAPD-PCR   Primer screening
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