| 应用B.melitensis 16M单克隆抗体建立羊布病的胶体金免疫层析检测体系 |
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| 引用本文： | 唐景峰,李晓艳,梅建军,刘 锴,王兴龙. 应用B.melitensis 16M单克隆抗体建立羊布病的胶体金免疫层析检测体系[J]. 勤云标准版测试, 2006, 0(11) |
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| 作者姓名： | 唐景峰 李晓艳 梅建军 刘 锴 王兴龙 |
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| 作者单位： | 吉林大学，军事医学科学院十一所 长春130062，军事医学科学院十一所，吉林大学，吉林大学，军事医学科学院十一所，长春130062，长春130062，长春130062，长春130062，长春130062 |
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| 基金项目： | 吉林省科技厅计划项目“布氏杆菌病快速检测技术的研究”（20050549）. |
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| 摘 要： | [目的]用B.melitensis16M提纯的LPS和O链抗原作为检测抗原,研制出针对B.melitensis16M的单克隆抗体(McAb),将其标记胶体金,建立一种诊断布病的胶体金免疫层析方法。[方法]B.melitensis16M全菌免疫Balb/C小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备McAb,测定免疫球蛋白亚类及亲和力。用HiTrapProteinGHP亲和层析纯化抗体并用胶体金标记,建立胶体金免疫层析方法。选择最佳反应模式组装成试纸条,对其特异性、敏感性、稳定性、阳性病料试验。[结果]筛选出能稳定分泌抗B.melitensis16M的种特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株2D10、3C6、1E10,单抗亚类分别为IgG2a、IgG1,亲和常数(k)介于1×10-8￣2.6×10-10。根据配对实验,以3C6为最佳包被抗体,2D10为最佳金标抗体。抗体IgG标记浓度为30μg/ml时,检测效果最佳。同时,与B.melitensis16M多抗IgG作为包被抗体、2D10为金标抗体的检测体系对比,两种包被方法组装的试纸条最低检出量为5.0×103CFU/ml,且不与其它菌发生交叉反应,保持期≥100d。以荧光定量PCR为参照,试纸条检测80份阳性病料,检检出率为100%。[结论]建立的胶体金免疫层析方法检测B.melitensis16M快速、简便、可靠,有望开发成为布病快速诊断试剂盒。
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| 关 键 词： | B.melitensis16M 单克隆抗体 胶体金免疫层析方法 |
Establishment a Colloidal gold-Immunochromatographic Assay of B.melitensis by Monoclonal Antibodies Against B.melitensis 16M |
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| Tang Jingfeng,Li Xiaoyan,Mei Jianjun,Liu Kai,Wang Xinglong. Establishment a Colloidal gold-Immunochromatographic Assay of B.melitensis by Monoclonal Antibodies Against B.melitensis 16M[J]. , 2006, 0(11) |
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| Authors: | Tang Jingfeng Li Xiaoyan Mei Jianjun Liu Kai Wang Xinglong |
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| Affiliation: | (1Jilin University, Changchun 130062; 2Eleven Institue, Academy of Military Medical Sciences, Changchun 130062) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | B.melitensis 16M Monoclonal antibody Colloidal gold-immunochromatographic assay |
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