| 转GsPPCK1基因苜蓿植株的获得及其耐碱性分析 |
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| 引用本文： | 魏正巍,朱延明,化烨,才华,纪巍,柏锡,王臻昱,文益东. 转GsPPCK1基因苜蓿植株的获得及其耐碱性分析[J]. 作物学报, 2013, 39(1): 68-75. DOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.00068 |
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| 作者姓名： | 魏正巍 朱延明 化烨 才华 纪巍 柏锡 王臻昱 文益东 |
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| 作者单位： | 东北农业大学生命科学学院, 黑龙江哈尔滨 150030 |
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| 基金项目： | 本研究由国家自然科学基金项目(31171578), 国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2011ZX08004002-002), 黑龙江省高校科技创新团队建设计划(2011TD005)和黑龙江省博士后基金(LBH-Z12353)资助。 |
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| 摘 要： | 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶激酶(phosphoenolpyruvate carboxylase kinase, PPCK)是一种钙不依赖的丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)类蛋白激酶, 参与碳氮代谢等多个生物学过程, 然而其在碱胁迫反应中的作用尚未见报道。本研究在前期野生大豆碱胁迫基因表达谱数据基础上, 采用同源克隆的方法分离野生大豆(Glycine soja)PPCK1基因, 该基因与大豆(Glycine max) PPCK1基因(AY374445)具有99%的相似性, 被命名为GsPPCK1。在50 mmol L–1 NaHCO3 胁迫处理3 h内, 根和叶中GsPPCK1基因上调表达, 属碱胁迫早期应答基因。通过农杆菌介导法对肇东苜蓿进行遗传转化, 并对RT-PCR阳性的超表达转基因株系进行耐碱性分析表明, 在100 mmol L–1 NaHCO3处理15 d后转基因株系生长状态良好, 而非转基因对照株系明显萎蔫、失绿、甚至死亡; 转基因株系的丙二醛含量和相对质膜透性显著低于非转基因株系(P<0.05), 而叶绿素含量和根系活力显著高于非转基因对照(P<0.05), 说明超量表达GsPPCK1基因增强了苜蓿的耐碱能力。以上结果表明, GsPPCK1参于植物耐碱胁迫反应过程, 在碱胁迫基因工程研究领域具有良好的理论和实际应用意义。
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| 关 键 词： | 肇东苜蓿 GsPPCK1 转基因株系 耐碱性分析 |
| 收稿时间： | 2012-02-13 |
Transgenic Alfalfa with GsPPCK1 and Its Alkaline Tolerance Analysis |
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| WEI Zheng-Wei,ZHU Yan-Ming,HUA Ye,CAI Hua,JI Wei,BAI Xi,WANG Zhen-Yu,WEN Yi-Dong. Transgenic Alfalfa with GsPPCK1 and Its Alkaline Tolerance Analysis[J]. Acta Agronomica Sinica, 2013, 39(1): 68-75. DOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.00068 |
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| Authors: | WEI Zheng-Wei ZHU Yan-Ming HUA Ye CAI Hua JI Wei BAI Xi WANG Zhen-Yu WEN Yi-Dong |
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| Affiliation: | College of Life Sciences, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Medicago sativa L. cv. Zhaodong GsPPCK1 Transgenic alfalfa Alkaline tolerance analysis |
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