| 集胞蓝细菌PCC 6803中CcmK2蛋白多克隆抗体的制备与检测 |
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| 引用本文： | 李盼,支瑶,汪方奎,陈雯莉.集胞蓝细菌PCC 6803中CcmK2蛋白多克隆抗体的制备与检测[J].华中农业大学学报,2018,37(1):12-16. |
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| 作者姓名： | 李盼 支瑶 汪方奎 陈雯莉 |
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| 作者单位： | 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，武汉 430070,华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，武汉 430070,华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，武汉 430070,华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，武汉 430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31570048）； 中央高校基本科研业务费专项（2014PY003） |
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| 摘 要： | CcmK2蛋白是集胞蓝细菌PCC 6803羧酶体外壳蛋白的主要组分,在羧酶体的组装与功能行使方面扮演重要角色。为解析其功能,本研究构建了原核表达载体pET28a-CcmK2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达带有6个组氨酸标签的CcmK2重组蛋白。通过金属亲和层析技术,将CcmK2重组蛋白纯化后免疫家兔,制备抗CcmK2多克隆抗体。基于Dot blot分析的结果显示:该多克隆抗体能够有效检测蓝细菌CcmK2蛋白;进一步的抗体特异性分析显示,CcmK2多克隆抗体与其他羧酶体外壳蛋白存在微弱的抗原抗体反应;最后,通过Western blot分析证实该多克隆抗体能够特异而灵敏地检测集胞蓝细菌PCC 6803中CcmK2的丰度。
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| 关 键 词： | 集胞蓝细菌PCC 6803 羧酶体 Western blot 二氧化碳浓缩机制 |
| 收稿时间： | 2017/4/21 0:00:00 |
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