| 牛传染性鼻气管炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王亚新,刘春羽,侯丽娜,温永俊,王凤雪.牛传染性鼻气管炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立[J].动物医学进展,2022(11):6-11. |
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| 作者姓名： | 王亚新 刘春羽 侯丽娜 温永俊 王凤雪 |
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| 作者单位： | 内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 内蒙古自治区自然科学基金项目(2020MS03047)； |
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| 摘 要： | 为检测牛传染性鼻气管炎病毒，通过设计针对gB基因的特异性引物扩增gB基因，构建阳性重组质粒。经过优化建立了牛传染性鼻气管炎病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。结果显示，建立的实时荧光定量PCR检测方法在阳性标准质粒拷贝数在5.474×104～5.474×109拷贝/μL时线性关系良好，线性相关系数R2=0.999 3。该方法最低检测限为5.747×102拷贝/μL;可以特异性检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛副流感病毒(BPIV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)不发生交叉反应。病毒滴度与拷贝数的线性关系良好，线性相关系数R2=0.985 4。该方法为牛传染性鼻气管炎病毒的快速检测提供了技术支持。
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| 关 键 词： | 牛传染性鼻气管炎 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR gB基因 |
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