犬冠状病毒RT—PCR检测方法的建立和初步应用 |
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引用本文: | 胡桂学 邹啸环. 犬冠状病毒RT—PCR检测方法的建立和初步应用[J]. 吉林农业大学学报, 1997, 19(4): 78-84 |
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作者姓名: | 胡桂学 邹啸环 |
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作者单位: | 吉林农业大学动科系,农牧大学军事兽医研究所 |
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基金项目: | 解放军“九·五”医药卫生科研基金 |
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摘 要: | 根据Weseling发表的犬冠状病毒(CCV)K378株纤突蛋白(S)基因序列,设计合成了4条寡聚核苷酸引物P1(18bp,1520~1537bp)、P2(19bp,2072~2090bp)和P3(20bp,2621~2640bp)、P4(20bp,2944~2963bp)。以此为引物,以从美国引进的CCVNL-18参考株反转录产物为模板,在国内首先建立了CCVRT-PCR方法,并初步应用于国内CCV分离株的鉴定。结果表明,以P1、P2和P3、P4为引物,只能从CCVNL-18株反转录产物中扩增出大小分别为571bp和343bp核苷酸片段,与理论设计值大小一致,而正常CRFK细胞和狂犬病等5种对照病毒扩增结果为阴性。RT-PCR可检出1μL做105和103倍稀释的CCVNL-18株反转录产物,说明其具有很高的敏感性。初步应用试验结果,可从2株国内分离的CCV反转录产物中扩增出571bp和343bp核苷酸片段。通过本研究不仅建立了敏感、特异的CCVRT-PCR检测方法,也为其S基因的克隆和序列测定奠定了基础。
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关 键 词: | 冠状病毒 RT-PCR 检测 犬病 |
Establishment of CCV RT-PCR Method and Primary Application |
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Abstract: | |
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Keywords: | canine coronavirus RT-PCR detect |
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