| 白菜型冬油菜类甜蛋白的筛选、克隆及其在低温胁迫下的表达 |
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| 引用本文： | 马骊,袁金海,孙万仓,刘自刚,曾秀存,武军艳,方彦,李学才,陈奇,许耀照,蒲媛媛,刘海卿,杨刚,刘林波. 白菜型冬油菜类甜蛋白的筛选、克隆及其在低温胁迫下的表达[J]. 作物学报, 2017, 43(4): 620-628. DOI: 10.3724/SP.J.1006.2017.00620 |
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| 作者姓名： | 马骊 袁金海 孙万仓 刘自刚 曾秀存 武军艳 方彦 李学才 陈奇 许耀照 蒲媛媛 刘海卿 杨刚 刘林波 |
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| 作者单位： | 1 甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室 / 甘肃省油菜工程技术研究中心 / 甘肃农业大学农学院, 甘肃兰州 730070；2 河西学院农业与生物技术学院, 甘肃张掖734000 |
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| 基金项目： | 本研究由国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-13), 国家自然科学基金项目(31460356, 31560397), 国家重点基础研究发展计划项目(973计划) (2015CB150206), 国家农业科技成果转化项目(2014G10000317), 甘肃省自然科学基金项目(145RJZG050), 科技部油菜杂种优势利用技术与强优势杂交种创制项目(2016YFD0101300)和丝绸之路经济带新疆核心区农田周年覆盖高效种植模式研究与示范项目(2016E02009)资助。 |
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| 摘 要： | 类甜蛋白是一种能在低温胁迫下诱导表达,增强植物抗逆性的关键蛋白质。本研究运用双向电泳结合质谱技术,筛选低温胁迫下陇油7号叶片差异蛋白点,从中分离出与抗寒密切相关的类甜蛋白。根据已发表植物类甜蛋白基因TLP的保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增陇油7号的DNA,获得TLP基因开放阅读框,长度为732 bp,编码243个氨基酸的蛋白质。生物信息学分析显示,与甘蓝型油菜(Brassica napus)的蛋白质氨基酸序列同源性高达99.18%,该基因在进化上高度保守,其保守序列属于植物的GH69-TLP-SF超家族,TLP相对分子质量和理论等电点分别为26.02 k D和9.15。TLP含有一个信号肽,为亲水性蛋白,亚细胞定位预测其是在内质网中合成的蛋白。二级结构预测表明陇油7号的TLP是由不规则卷曲和延伸链组成的不稳定蛋白。实时荧光定量和半定量分析显示,在适当阈值的低温胁迫下TLP基因表达量上调,表明该基因在白菜型冬油菜陇油7号适应低温胁迫过程中发挥重要作用。
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| 关 键 词： | 白菜型冬油菜 双向电泳 低温 类甜蛋白 |
| 收稿时间： | 2016-01-19 |
Selection and Cloning of Thaumatin-like Protein (TLP) Gene from Winter Brassica rapa and Its Expression under Low Temperature Stress |
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| MA Li,YUAN Jin-Hai,SUN Wan-Cang,LIU Zi-Gang,ZENG Xiu-Cun,WU Jun-Yan,FANG Yan,LI Xue-Cai,CHEN Qi,XU Yao-Zhao,PU Yuan-Yuan,LIU Hai-Qing,YANG Gang,LIU Lin-Bo. Selection and Cloning of Thaumatin-like Protein (TLP) Gene from Winter Brassica rapa and Its Expression under Low Temperature Stress[J]. Acta Agronomica Sinica, 2017, 43(4): 620-628. DOI: 10.3724/SP.J.1006.2017.00620 |
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| Authors: | MA Li YUAN Jin-Hai SUN Wan-Cang LIU Zi-Gang ZENG Xiu-Cun WU Jun-Yan FANG Yan LI Xue-Cai CHEN Qi XU Yao-Zhao PU Yuan-Yuan LIU Hai-Qing YANG Gang LIU Lin-Bo |
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| Affiliation: | 1.Gansu Key Laboratory of Crop Improvement and Germplasm Enhancement / Rapeseed Engineering Research Center of Gansu Province / College of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China;2.College of Agronomy and Biotechnology, Hexi University, Zhangye 734000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Winter Brassica rapa Two-dimensional gel electrophoresis Lower temperature TLP |
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