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猪流行性腹泻病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:桑益旸,吴昊,涂光岚,孙涛,王恒安. 猪流行性腹泻病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 上海交通大学学报(农业科学版), 2017, 0(6): 26-30
作者姓名:桑益旸  吴昊  涂光岚  孙涛  王恒安
作者单位:上海交通大学 农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240,上海交通大学 农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240,上海交通大学 农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240,上海交通大学 农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240,上海交通大学 农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海 200240
基金项目:上海市科委攻关项目(15391901600)
摘    要:基于猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的N基因,建立了PEDV的TaqMan探针RT-PCR检测方法。以标准质粒绘制log10拷贝数与Ct之间标准曲线的线性相关系数值为0.996,检测灵敏度为100拷贝/μL,对传染性胃肠炎病毒、繁殖与呼吸障碍综合征病毒、伪狂犬病毒和圆环病毒2型等几种猪病毒的检测结果均为阴性,批内和批间的变异系数均小于1%,表明该方法具有良好的特异性、灵敏性和稳定性。对不同代次细胞培养上清中的病毒样品进行检测,结果表明该方法能够满足PEDV野毒株分离过程中的病毒定量检测需要。

关 键 词:猪流行性腹泻病毒   TaqMan   探针   RT-PCR
收稿时间:2016-12-26

Development of TaqMan Fluorescence Quantitative PCR for Detection of Porcine Epidemic Diarrhea Virus
SANG Yi-yang,WU Hao,TU Guang-lan,SUN Tao and WANG Heng-an. Development of TaqMan Fluorescence Quantitative PCR for Detection of Porcine Epidemic Diarrhea Virus[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science), 2017, 0(6): 26-30
Authors:SANG Yi-yang  WU Hao  TU Guang-lan  SUN Tao  WANG Heng-an
Affiliation:Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China,Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China,Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China,Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China and Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China
Abstract:
Keywords:porcine epidemic diarrhea virus   TaqMan   probe   RT-PCR
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