| 用单价STV制备单分子蛋白质-DNA复合物的研究 |
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| 引用本文： | 何珊珊,侯彩玲,代田纯,杨秋萍,王志民.用单价STV制备单分子蛋白质-DNA复合物的研究[J].上海交通大学学报(农业科学版),2017(6):39-44. |
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| 作者姓名： | 何珊珊 侯彩玲 代田纯 杨秋萍 王志民 |
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| 作者单位： | 上海交通大学 农业与生物学院,上海 200240,上海交通大学 农业与生物学院,上海 200240,上海交通大学 农业与生物学院,上海 200240,上海交通大学 农业与生物学院,上海 200240,上海交通大学 农业与生物学院,上海 200240 |
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| 基金项目： | 上海交通大学重大项目及团队培育基金(X199775) |
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| 摘 要： | 将生物素结合位点失活的链霉亲和素(streptavidin,STV)变异体变性后的亚基与野生型STV变性后的亚基以摩尔比3∶1的比例混合,然后重折叠复性,镍柱层析分离得到只有一个有活性生物素结合位点的突变体STV,即单价STV。将单价STV与500bp一端生物素标记的双链DNA(biotin-DNA)按不同摩尔比混合孵育,探讨使用单价STV制备1STV-1DNA复合物的可行性,并筛选制备1STV-1DNA复合物的最佳混合摩尔比。结果表明,在所用的摩尔比梯度中,单价STV与biotin-DNA混合的最佳摩尔比为1∶1,与使用野生型STV制备方法相比,使用单价STV更为简便、高效,为单分子DNA操纵、单分子DNA-蛋白质相互作用研究以及单分子DNA芯片的制备等提供了便捷的方法。
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| 关 键 词： | 单价链霉亲和素 单分子操纵 STV-DNA复合物 |
| 收稿时间： | 2016/10/26 0:00:00 |
Studies on Preparation of Single Protein-DNA Conjugates Using Monovalent Streptavidin |
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| HE Shan-shan,HOU Cai-ling,DAI Tian-chun,YANG Qiu-ping and WANG Zhi-min.Studies on Preparation of Single Protein-DNA Conjugates Using Monovalent Streptavidin[J].Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science),2017(6):39-44. |
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| Authors: | HE Shan-shan HOU Cai-ling DAI Tian-chun YANG Qiu-ping and WANG Zhi-min |
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| Institution: | School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240, China,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240, China,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240, China,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240, China and School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | monovalent strepavidin single-molecule manipulation STV-DNA conjugates |
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