| 大肠杆菌VT噬菌体受体基因重组质粒的构建 |
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| 引用本文： | 严亚贤,陆承平. 大肠杆菌VT噬菌体受体基因重组质粒的构建[J]. 上海交通大学学报(农业科学版), 2002, 20(2): 85-89,94 |
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| 作者姓名： | 严亚贤 陆承平 |
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| 作者单位： | 1. 上海交通大学,动物科学系,上海,201101;南京农业大学,农业部,动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095
2. 南京农业大学,农业部,动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095 |
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| 基金项目： | 上海交通大学合作基金 ( 2 0 0 2～ 2 0 0 4 |
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| 摘 要： | 取含有卡那霉素抗性（Kan^R)基因的自杀性质粒pJP55603和含vpr全长基因的pUC19phiΦRID质粒，分别采用粘性末端及平末端两种连接法，2种质粒Hinc II单酶切后进行平末端连接，经鉴定未得到重组质粒，pJP5603用Hinc II和Xma I消化，回收3kb的载体质粒，pUC19ΦRID用Hinc Ⅱ和Age I消化，回收778bp vpr目的基因，通过粘性末端连接，转化到感受态细菌CC118λpir，利用Kan^R进行筛选，获得的克隆经Acc I酶切鉴定和PCR检测，确定得到重质粒，即pYYvpr，将重组质粒的DNA转化到含有全长vpr基因的感受态细胞MC1061，筛选到的克隆经PCR检测，得到一株克隆既扩增出vpr基因，又扩增出Kan^R基因，初步鉴定该克隆为MC1061的vpr同源基因突变株，暂定名为MC1061Δvpr，从而为研究vpr基因的功能提供了重要的试验材料。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 噬菌体受体 基因重组质粒 vpr基因 PCR vero毒素 |
| 文章编号： | 1000-193X(2002)02-0085-05 |
Construction of recombinant plasmid pYYvpr of gene about receptor of VT bacteriophage in E.coli |
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| YAN Ya xian,LU Cheng ping. Construction of recombinant plasmid pYYvpr of gene about receptor of VT bacteriophage in E.coli[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science), 2002, 20(2): 85-89,94 |
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| Authors: | YAN Ya xian LU Cheng ping |
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| Affiliation: | YAN Ya xian 1,2,LU Cheng ping 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | plasmid vpr gene recombinant digestion transformation PCR |
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