鸽新城疫病毒的分离与鉴定

将分离的疑似新城疫病毒采用蔗糖密度梯度离心对病毒液进一步纯化,经透射电镜观察,可见该疑似病毒具有新城疫病毒直径大小相符的病毒粒子以及囊膜、纤突等形态特征。根据GenBank中注册的新城疫病毒F基因序列分别设计一对特异引物,采用RT-PCR方法扩增相应的目的片段,将cDNA片段分别克隆至pMD-18T载体进行序列测定,获得一株新城疫F基因的部分序列:长度为1625bp,属于基因Ⅶ型,F蛋白氨基酸的裂解位点为112R-R-Q-K-R-F117,具有典型的强毒株特征;F0氨基酸序列中有6个糖基化部位点和3个与病毒融合相关的重要抗原位点。