| 黑斑侧褶蛙脑微血管内皮细胞的原代培养及鉴定 |
| |
| 引用本文： | 艾单寒,侯家昊,刘芳园,顾泽茂,胡瑞雪. 黑斑侧褶蛙脑微血管内皮细胞的原代培养及鉴定[J]. 水产学报, 2023, 47(8): 089408-089408 |
| |
| 作者姓名： | 艾单寒 侯家昊 刘芳园 顾泽茂 胡瑞雪 |
| |
| 作者单位： | 华中农业大学水产学院,湖北 武汉 430070;湖北省水生动物病害防控工程技术研究中心,湖北 武汉 430070;华中农业大学水产学院,湖北 武汉 430070;湖北省水生动物病害防控工程技术研究中心,湖北 武汉 430070;华中农业大学双水双绿研究院,湖北 武汉 430070;教育部长江经济带大宗水生生物产业绿色发展工程研究中心,湖北 武汉 430070;华中农业大学水产学院,湖北 武汉 430070;湖北省水生动物病害防控工程技术研究中心,湖北 武汉 430070;教育部长江经济带大宗水生生物产业绿色发展工程研究中心,湖北 武汉 430070 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(32202990);湖北省自然科学基金 (2021CFB128);中国博士后科学基金 (2021M701351) |
| |
| 摘 要： | 为了建立蛙脑微血管内皮细胞原代培养方法,实验以黑斑侧褶蛙脑组织为实验材料,在无菌条件下分离出大脑灰质,利用0.1%Ⅱ型胶原酶和胶原酶-分散酶进行消化,经过Percoll密度梯度离心后,将获取的脑微血管段接种于鼠尾胶包被的培养瓶中,于28°C、5%CO2条件下原代培养蛙脑微血管内皮细胞,并通过细胞形态学观察和Ⅷ因子相关抗原免疫荧光对细胞进行鉴定,最后用四唑蓝比色法(MTT)测定细胞的生长状态。结果显示,微血管段在体外培养1 d后开始贴壁生长,并逐渐扩大成团簇状,培养至7 d时,细胞呈“铺石路样”镶嵌式排列,表现为区域性单层生长;Ⅷ因子免疫荧光检测发现胞质呈红色,表达为阳性,阳性细胞率达97%以上;MTT实验显示,细胞在第3～5天时生长速率最快。本研究首次建立了蛙脑微血管内皮细胞的原代培养与鉴定方法,为体外研究蛙类神经性疾病的发病机理奠定基础,也为相关药物的研发和筛选提供了细胞模型。
|
| 关 键 词： | 黑斑侧褶蛙 脑组织 微血管内皮细胞 原代培养 |
| 收稿时间： | 2021-07-20 |
| 修稿时间： | 2022-06-17 |
Primary culture and identification of Pelophylax nigromaculata brain microvascular endothelial cells (BMECs) |
| |
| AI Danhan,HOU Jiahao,LIU Fangyuan,GU Zemao,HU Ruixue. Primary culture and identification of Pelophylax nigromaculata brain microvascular endothelial cells (BMECs)[J]. Journal of Fisheries of China, 2023, 47(8): 089408-089408 |
| |
| Authors: | AI Danhan HOU Jiahao LIU Fangyuan GU Zemao HU Ruixue |
| |
| Affiliation: | College of Fisheries, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;Hubei Engineering Technology Research Center for Aquatic Animal Diseases Control and Prevention, Wuhan 430070, China;College of Fisheries, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;Hubei Engineering Technology Research Center for Aquatic Animal Diseases Control and Prevention, Wuhan 430070, China;Shuangshui Shuanglü Institute, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;Engineering Research Center of Green development for Conventional Aquatic Biological Industry in the Yangtze River Economic Belt, Ministry of Education, Wuhan 430070, China; College of Fisheries, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;Hubei Engineering Technology Research Center for Aquatic Animal Diseases Control and Prevention, Wuhan 430070, China;Engineering Research Center of Green development for Conventional Aquatic Biological Industry in the Yangtze River Economic Belt, Ministry of Education, Wuhan 430070, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Pelophylax nigromaculata brain microvascular endothelial cells primary culture |
|
| 点击此处可从《水产学报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《水产学报》下载全文 |
|
