| 检测葡萄抗黑痘病基因DNA探针的合成及应用 |
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| 引用本文： | 张剑侠,王跃进,杨亚洲,余皓. 检测葡萄抗黑痘病基因DNA探针的合成及应用[J]. 农业生物技术学报, 2010, 18(5). DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.05.025 |
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| 作者姓名： | 张剑侠 王跃进 杨亚洲 余皓 |
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| 作者单位： | 农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室,杨凌712100;陕西省农业分子生物学实验室,杨凌712100;西北农林科技大学园艺学院,杨凌712100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 依据中国野生葡萄(Vitis pseudoreticulata)抗黑痘病(Sphaceloma ampelinum)基因RAPD标记OPS03-1354的全长序列,设计合成了两个寡聚核苷酸R1(5'-CAGAGGTCCCTAGCTAAT-3')和R2(5'-ACA ATCACCCAACTCCTC-3')作为引物.首先对获得该RAPD标记的种间杂交组合白河-35-1(V.pseudoret-iculata clone Baihe-35-1)×佳利酿(V.vinifera cv.Carignane)亲本及其F2 51株进行PCR分析,其中寡聚核苷酸R2能在抗黑痘病植株中扩增出约1100 bp的DNA片段.进一步用R2对另一种间杂交组合广西-1(V.pseudoreticulata clone Guangxi-1)×京可晶(V.vinifera cv.Jingkejing)F1 339株进行PCR检测,R2能在抗病植株中扩增出约1100 bp的DNA片段.最后用R2对48份葡萄资源包括中国野生葡萄、美国野生葡萄和欧洲葡萄进行了PCR检测,在抗病株系和品种中也能扩增出这一片段.结果表明,获得的约1100bp特异片段为葡萄抗黑痘病基因的序列特异性扩增区(SCAR)标记,凡扩增出该SCAR标记的植株即是抗黑痘病基因的携带者和抗黑痘病性状的表达者.将该SCAR标记克隆与测序,其实际长度为1110 bp,命名为SCS03-1110.获得该SCAR标记的18 bp寡聚核苷酸R2(5'-ACAATCACCCAACTCCTC-3')具有检测葡萄抗黑痘病基因的DNA探针作用.
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| 关 键 词： | 葡萄 黑痘病 抗病基因 DNA探针 合成 应用 |
Synthesis and Application on DNA Probe for Detecting Anthracnoseresistance Gene in Grape |
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| Zhang Jianxia,Wang Yuejin,Yang Yazhou,Yu Hao. Synthesis and Application on DNA Probe for Detecting Anthracnoseresistance Gene in Grape[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2010, 18(5). DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.05.025 |
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| Authors: | Zhang Jianxia Wang Yuejin Yang Yazhou Yu Hao |
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