对虾桃拉综合征病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 方成俊,陈俊玉,王碧生,杨奇志,潘迎芬,陈晖,陈旭新.对虾桃拉综合征病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].福建畜牧兽医,2013(2). |
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作者姓名: | 方成俊 陈俊玉 王碧生 杨奇志 潘迎芬 陈晖 陈旭新 |
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作者单位: | 1. 东山出入境检验检疫局 福建东山 363401 2. 美国Protein Simple公司中国广州办事处 广州 510000 |
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摘 要: | 目的:建立一种敏感、定量、快速、特异、安全的实时荧光定量PCR检测方法,用于对虾桃拉综合征病毒(TSV)的早期诊断和监测.方法:从GeneBank下载所有Taura病毒的序列,用生物软件进行序列比对,在TSV保守区序列设计特异性引物和探针.对实时荧光定量PCR反应条件进行优化,提高特异性和灵敏度.结果:检测灵敏度达450个病毒拷贝,超过普通PCR100倍;检测特异性为100%,高于普通PCR;检测时间在60 min内,约为普通PCR的1/4;有效解决PCR产物的气溶胶污染问题,安全性高.结论:本研究应用荧光定量PCR技术用于对虾桃拉综合征病毒检测具有敏感、定量、快速、特异、安全等优点.
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关 键 词: | 桃拉综合征病毒 实时荧光定量PCR(FQ-PCR) 检测 |
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