| 胚柄特异性表达顺式元件结合蛋白酵母单杂交文库的构建 |
| |
| 引用本文： | 宋国琦,王兴军,赵传志,夏晗. 胚柄特异性表达顺式元件结合蛋白酵母单杂交文库的构建[J]. 农业生物技术学报, 2011, 19(5). DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.05.023 |
| |
| 作者姓名： | 宋国琦 王兴军 赵传志 夏晗 |
| |
| 作者单位： | 山东省农业科学院高新技术研究中心,山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室;农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开发实验室,济南250100 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30871324); 山东省优秀中青年科学家奖励基金(No.2006BS06008); 山东省农业科学院博士基金课题(No.2006YBS001)共同资助 |
| |
| 摘 要： | 旨在构建酵母单杂交文库用于筛选与胚柄特异基因G564启动子顺式元件结合的转录因子。本研究根据植物胚柄特异表达基因G564启动子关键序列(GAAAAGCGAA)合成了5次串联重复序列,并与报告质粒pHIS2.1连接构建诱饵载体pHIS2.1-G564-5A;以纯化的拟南芥(Arabidopsis thaliana)幼嫩种子mRNA为模板,合成SMARTTMⅢ和CDSⅢ锚定末端dscDNA;并将dscDNA与线性化融合表达载体pGADT7-Rec2以及诱饵载体pHIS2.1-G564-5A共转化到酵母Y187,构建酵母单杂交文库。文库的共转化效率为5.53×105cfu/μg。对文库中的阳性克隆进行测序,获得117条可读序列。对其进行基因功能注释并进一步分析基因的功能发现,具有DNA结合功能的蛋白14个,具有蛋白质结合功能的蛋白8个。上述22个蛋白包括TATA结合蛋白1(TBP1),支架结构相关区(SAR)DNA-结合蛋白,胚珠发育蛋白,G-box结合因子1(GBF1),组蛋白H3等。本研究为分离和克隆胚柄中特异表达的转录因子提供了候选基因。
|
| 关 键 词： | 胚柄特异基因 顺式元件 酵母单杂交 |
Construction of Yeast One-hybrid Library for Screening Suspensor Specific cis-element Binding Protein Genes |
| |
| Song Guoqi,Wang Xingjun,Zhao Chuanzhi,Xia Han. Construction of Yeast One-hybrid Library for Screening Suspensor Specific cis-element Binding Protein Genes[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2011, 19(5). DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.05.023 |
| |
| Authors: | Song Guoqi Wang Xingjun Zhao Chuanzhi Xia Han |
| |
| Affiliation: | Song Guoqi1,2 Wang Xingjun1,2* Zhao Chuanzhi1,2 Xia Han1,2 1 High-tech Research Center,Shandong Academy of Agricultural Sciences,Key Laboratory for Genetic Improvement of Crop Animal and Poultry of Shandong Province,Ji'nan 250100,China,2 Key Laboratory of Crop Genetic Improvement and Biotechnology of Huanghuaihai,Ministry of Agriculture |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Suspensor specific gene cis-element Yeast one hybrid |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
