柱层析法测定叶黄素含量应注意的几个问题

1 所用仪器设备和试剂的注意事项 1.1 色谱柱的尺寸为:内径12.5mm×长30cm,带活塞。测定所用色谱柱如果内径过大,则吸附剂和洗脱液消耗量均多;内径太小,则单位长度内柱中吸附剂的量减少,对叶黄素的吸附容量随之下降。同时活塞上不需涂润滑剂。如果涂上凡士林等润滑剂,则有可能因润滑剂溶于洗脱液而干扰比色测定。此外色谱柱和承接洗脱液的刻度管或容量瓶,应该是干燥无水的。 1.2 吸附剂氧化镁与疏松剂硅藻土的混合比例为1:1。为确保二者混合均匀,须机械混合30min以上。混匀后,105℃烘24h即被活化,亦可在200℃下烘5h快速活化。活化后放人干燥器内储存,如存放一段时间后再使用时,应再活化。无水硫酸钠在临用前,须105℃以上温度烘5h以上,以除去吸附的水。