一种新的植物泛素结合酶体外泛素化检测方法 |
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引用本文: | 刘译阳,韩燕,李国卫,崔凤.一种新的植物泛素结合酶体外泛素化检测方法[J].山东农业科学,2018(3). |
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作者姓名: | 刘译阳 韩燕 李国卫 崔凤 |
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作者单位: | 山东省农业科学院生物技术研究中心/山东省作物栽培生态生理重点实验室; |
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摘 要: | 泛素结合酶是一类在泛素化修饰过程中起重要生物化学功能的蛋白。对于被预测为泛素结合酶的蛋白进行体外泛素化活性检测,是确定其泛素结合酶功能必不可少的试验步骤,试验结果可以为后续研究提供重要的线索。目前体外泛素化反应存在体外表达纯化蛋白工作量大、反应复杂、假阴性率高等问题。本研究针对以上问题进行了改良,开发出一种新的植物泛素结合酶活性体外检测方法,该方法无需裂解细胞提取、纯化蛋白,也不需要做体外反应,简便易行,结果更稳定可靠。应用该方法对花生泛素结合酶Ah UBC34和盐芥泛素结合酶Ts UBC33进行了检测,结果证明这两个蛋白都具有泛素结合酶活性。
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