甘蔗花叶病毒衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备 |
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引用本文: | 许小洁,张继武,徐德坤,殷复伟,田延平,李向东.甘蔗花叶病毒衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备[J].山东农业科学,2018(8). |
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作者姓名: | 许小洁 张继武 徐德坤 殷复伟 田延平 李向东 |
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作者单位: | 山东农业大学植物保护学院植物病毒学研究室;山东省农业微生物重点实验室;临沂市植物保护站;泰安市农技站 |
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摘 要: | 将甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)第Ⅰ组分离物DWK1和第Ⅳ组分离物DWK2的衣壳蛋白(coat protein,CP)基因分别克隆到原核表达载体pEHISTEV,得到重组质粒pEHISTEV-SCMV-Ⅰ-CP和pEHISTEV-SCMV-Ⅳ-CP。将两个重组质粒转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导,均表达出分子量为38 kD的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,免疫新西兰长耳兔5次,获得了SCMV-ⅠCP和SCMV-ⅣCP的多克隆抗体。间接ELISA结果表明,两种血清的效价均达到1∶8192。Western Blot结果表明,利用SCMV-ⅠCP制备的抗血清与DWK1反应更强,而利用SCMV-ⅣCP制备的抗血清与DWK2反应更强。本研究为SCMV检测及CP功能研究奠定了基础。
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