猪细小病毒NS1基因真核表达载体pEGFP-N1-NS1的构建与表达 |
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作者姓名: | 周雍 张驰 王朋涛 韩丽 靳晓慧 魏战勇 |
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作者单位: | 河南农业大学牧医工程学院;河南省动物性食品安全重点实验室 |
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摘 要: | 根据Gen Bank上发表的PPV的基因组序列,设计扩增非结构蛋白NS1基因的特异性引物。通过PCR方法克隆NS1基因,经双酶切及与pEGFP-N1载体连接构建了真核表达载体pEGFP-N1-NS1,将双酶切和测序鉴定正确的质粒转染至293T细胞,经过荧光观察和PCR方法鉴定。结果表明,克隆了猪细小病毒NS1基因的全序列1989 bp,成功构建了NS1基因的真核表达载体,并在293T细胞中转染表达。
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