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金黄地鼠Kcnq1基因的分子克隆与鉴定以及在多种器官组织中的表达差异分析
引用本文:孔德龙,潘晓燕,秦莹,殷玉鹏,安培培,陈玥,唐博,李子义.金黄地鼠Kcnq1基因的分子克隆与鉴定以及在多种器官组织中的表达差异分析[J].中国兽医学报,2013,33(5).
作者姓名:孔德龙  潘晓燕  秦莹  殷玉鹏  安培培  陈玥  唐博  李子义
作者单位:1. 吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林长春,130062
2. 吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林长春130062;吉林医药学院,吉林吉林市132013
3. 西北农林科技大学,陕西杨凌,712100
基金项目:国家自然科学基金青年基金资助项目,博士点新教师基金资助项目
摘    要:本研究对金黄地鼠Kcnq1基因进行分子克隆与鉴定以及在多种器官组织的表达差异进行分析,旨在研究Kcnq1基因在地鼠各组织器官中的功能.提取金黄地鼠心脏组织总RNA,根据大鼠Kcnq1的保守序列区域设计引物TK1,用RT-PCR化后的cDNA在T4连接酶的作用下与pMD18-T载体特异性连接,转化感受态大肠杆菌DH5a中,筛选重组子并酶切鉴定,将鉴定后的重组子进行DNA测序.提取心、肝、脾、肺、肾各组织总RNA,并反转,将各组织cDNA做荧光定量检测,检测各组织表达量的差异.结果,克隆出金黄地鼠Kcnq1基因477 bp的部分片段长度,推测出编码的159个氨基酸.与大鼠等物种Kcnq1基因比对,核苷酸和氨基酸序列均具有较高的同源性.荧光定量结果显示,Kcnq1在金黄地鼠心脏中表达量最高,在肺脏和肾脏中均有较高表达,在脾脏中低度表达,在肾脏中基本不表达.该研究结果为深入研究金黄地鼠KCNQ1基因功能奠定了基础.

关 键 词:金黄地鼠  Kcnq1  分子克隆  表达差异

Molecular cloning and identification of Kcnq1 gene and its expression differences in a variety of organs in golden hamsters
Abstract:
Keywords:golden hamster  Kcnq1  molecular clone  expression differences
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