| 绵羊痘病毒新疆株的分离及结构蛋白P32基因序列分析 |
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| 引用本文： | 魏婕,薛英,苗书魁,窦小龙,任晓冰,马文戈,黄炯.绵羊痘病毒新疆株的分离及结构蛋白P32基因序列分析[J].新疆农业科学,2015,52(4):732. |
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| 作者姓名： | 魏婕 薛英 苗书魁 窦小龙 任晓冰 马文戈 黄炯 |
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| 作者单位： | 新疆畜牧科学院兽医研究所,乌鲁木齐,830000;新疆农业大学,乌鲁木齐,830052 |
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| 摘 要： | 目的]对绵羊痘病毒当地流行毒株的分离和其结构蛋白P32基因的克隆和序列进行分析,明确引起新疆本地绵羊流行痘病的病毒种类,掌握当前流行毒株的变异情况,为绵羊痘的预防控制及将来研制高效安全疫苗提供科学依据.方法]将两例疑似患有羊痘的绵羊肺脏组织病料接种于MDBK细胞进行病毒分离,细胞病变组织经处理后通过电子显微镜观察分离病毒.以分离病毒基因组DNA为模板,通过PCR扩增绵羊痘病毒结构蛋白P32基因,并对目的基因进行克隆和基因序列和蛋白生物信息学分析.结果]两例病料组织接种MDBK细胞后均产生明显的细胞病变,电子显微镜观察可见到约200 nm大小、椭圆形有囊膜的典型痘病毒粒子.对两株病毒表面膜结构蛋白P32基因PCR扩增均可获得与预期大小一致的约972 bp片段,氨基酸序列分析表明分离毒株SPV/Miquang/2013和SPV/Kuche/2013病毒P32基因与绵羊痘病毒参考株同源性分别达96.9;～99.4;和97.5;～100;,生物信息学分析发现SPV/Miquang/2013株P32蛋白有两个关键氨基酸位点发生变异,即第78位谷氨酸突变为赖氨酸,第293位异亮氨酸突变为苏氨酸.结论]从疑似病例中分离到两株病毒,通过电镜观察及P32基因扩增测序,与其他羊痘病毒比对后鉴定分离毒株为绵羊痘病毒,分别命名为SPV/Miquan/2013和SPV/Kuche/2013.SPV/Miquan/2013的P32蛋白同其他绵羊痘病毒的两个氨基酸位点发生明显突变.
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| 关 键 词： | 绵羊痘病毒 分离 鉴定 序列分析 |
| 收稿时间： | 2015-04-25 |
Isolation and Identification of Sheep Pox Virus Isolated from Xinjiang and Analysis of the Sequence of Structural Protein P32 |
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| WEI Jie,XUE Ying,MIAO Shu-kui,DOU Xiao-long,REN Xiao-bing,MA Wen-ge,HUANG Jiong.Isolation and Identification of Sheep Pox Virus Isolated from Xinjiang and Analysis of the Sequence of Structural Protein P32[J].Xinjiang Agricultural Sciences,2015,52(4):732. |
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| Authors: | WEI Jie XUE Ying MIAO Shu-kui DOU Xiao-long REN Xiao-bing MA Wen-ge HUANG Jiong |
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