| 新城疫病毒V蛋白C端酵母双杂交诱饵质粒的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 高小龙,仝丽娜,郭承意,周雷,杨峻鹏,张诚,李增魁,文英,李英.新城疫病毒V蛋白C端酵母双杂交诱饵质粒的构建与鉴定[J].安徽农业大学学报,2021,48(2):241-244. |
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| 作者姓名： | 高小龙 仝丽娜 郭承意 周雷 杨峻鹏 张诚 李增魁 文英 李英 |
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| 作者单位： | 青海大学农牧学院,西宁810000 |
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| 基金项目： | 青海省科技厅自然科学基金青年项目（2018-ZJ-952Q）资助。 |
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| 摘 要： | 为构建新城疫病毒(NDV)V蛋白C端酵母双杂交诱饵质粒,用RNA试剂盒提取NDV F48E9株的RNA,通过反转录试剂盒将抽提的RNA反转录,以反转录合成的eDNA为模板,通过PCR扩增,获得V蛋白C端基因(VCTD).通过酶切连接的方法将V蛋白C端基因克隆至pGBKT7载体上,命名为pGBKT7-VCTD.将pGBKT7-VCTD转化酵母Y2H Gold酵母感受态细胞,转化产物涂布营养缺陷型平板,观察平板上菌落生长情况,判定诱饵质粒有无自激活能力:同时挑取平板上的生长的菌落接种液体培养基培养,绘制生长曲线,判定pGBKT7-VCTD诱饵质粒有无毒性.酶切和测序结果表明,成功构建pGBKT7-VCTD诱饵质粒,且该诱饵质粒在酵母细胞中无毒性和自激活能力.本研究成功构建了pGBKT7-VCTD诱饵质粒,为筛选NDVV蛋白C端纳米抗体奠定基础.
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| 关 键 词： | 新城疫病毒 V蛋白 诱饵质粒 |
| 收稿时间： | 2020/6/5 0:00:00 |
Construction and characterization of Newcastle disease virus V protein C terminal domain Yeast-two hybrid bait plasmid |
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| GAO Xiaolong,TONG Lin,GUO Chengyi,ZHOU Lei,YANG Junpeng,ZHANG Cheng,LI Zengkui,WEN Ying,LI Ying.Construction and characterization of Newcastle disease virus V protein C terminal domain Yeast-two hybrid bait plasmid[J].Journal of Anhui Agricultural University,2021,48(2):241-244. |
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| Authors: | GAO Xiaolong TONG Lin GUO Chengyi ZHOU Lei YANG Junpeng ZHANG Cheng LI Zengkui WEN Ying LI Ying |
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| Institution: | College of Agriculture and Animal Husbandry, Qinghai University, Xining 810000 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Newcastle disease virus V protein bait plasmid |
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