微管蛋白荧光探针的制备及其在蚕豆叶片保卫细胞中的组装 |
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引用本文: | 于荣,袁明,王学臣. 微管蛋白荧光探针的制备及其在蚕豆叶片保卫细胞中的组装[J]. 农业生物技术学报, 2004, 12(1): 48-51 |
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作者姓名: | 于荣 袁明 王学臣 |
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作者单位: | 1. 首都师范大学生物系,北京,100037;中国农业大学生物学院植物生理生化国家重点实验室,北京,100094 2. 中国农业大学生物学院植物生理生化国家重点实验室,北京,100094 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展规划项目(No.G19990117)和北京市科技新星计划(B类)资助. |
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摘 要: | 从新鲜猪脑中提取微管蛋白(两个循环的解聚甘聚合超速离心),经DEAE-Sephadex A50离子层析纯化及罗丹明荧光标记,得到浓度为10.8mg/mL和染料蛋白比0.6(Dye/Protein=0.6)的猪脑微管蛋白荧光探针。将其显微注射于蚕豆(vicia faba L.)叶片下表皮的保卫细胞中,激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)下观察,发现该荧光标记微管蛋白可以顺利地组装到保卫细胞的微管骨架上,5~10min即可清楚地观察到整合于保卫细胞中的微管网络。在开放气孔保卫细胞中,周质微管(cortical microtubule)沿细胞的腹壁向背壁辐射状排布;而关闭气孔保卫细胞中周质微管则解聚为零碎小片段。以上实验结果为在活体条件下,进一步精细研究气孔运动过程中保卫细胞微管骨架的动态变化提供了可靠的实验基础。
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关 键 词: | 微管蛋白荧光探针 显微注射 蚕豆 保卫细胞 组装 |
修稿时间: | 2003-01-21 |
Preparation of Rhodamine-labelled Tubulin and Its Reassembly in Guard Cells of Leaves (Vicia faba L.) |
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Abstract: | |
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