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可视化的RT-LAMP方法检测禽白血病病毒
引用本文:刘业兵,张磊,孙跃辉,毛娅卿,李俊平,宁宜宝. 可视化的RT-LAMP方法检测禽白血病病毒[J]. 畜牧兽医学报, 2011, 42(1)
作者姓名:刘业兵  张磊  孙跃辉  毛娅卿  李俊平  宁宜宝
作者单位:1. 中国兽医药品监察所,北京,100081
2. 天津大学,天津,300072
摘    要:本研究旨在建立一种快速检测禽白血病病毒(ALV)的RT-LAMP方法.根据GenBank中ALV序列,在其保守序列区域设计了多套LAMP引物,通过LAMP Real-time Turbidimeter仪对ALV的LAMP引物、反应体系及反应进程进行监测和分析,以评价该方法的特异性和敏感性,并对加入SYBR Green Ⅰ肉眼判定与仪器监测结果进行比对.结果表明:建立的RT-LAMP方法在63℃水浴中36 min可对ALV核酸进行高效扩增,在反应结束后加入SYBR Green I肉眼判断结果与Real-time Turbidimeter仪检测结果一致;该方法具有很强特异性,对其它相关鸡病病原检测结果均为阴性;其检出限量为14.2 pg·μL-1,显示出很高的敏感性;用建立的LAMP方法对24个样品进行检测,结果表明LAMP法与其原检测结果基本一致;本研究建立了可对ALV进行快速检测并可肉眼判定结果的可视化RT-LAMP方法,其操作简便、无需昂贵设备,适用于ALV的快速检测.

关 键 词:禽白血病病毒  环介导等温扩增技术(LAMP)  检测

Visualized Detection of Avian Leukosis Virus by Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification Assay
LIU Ye-bing,ZHANG Lei,SUN Yue-hui,MAO Ya-qing,LI Jun-ping,Ning Yi-bao. Visualized Detection of Avian Leukosis Virus by Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification Assay[J]. Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences, 2011, 42(1)
Authors:LIU Ye-bing  ZHANG Lei  SUN Yue-hui  MAO Ya-qing  LI Jun-ping  Ning Yi-bao
Abstract:
Keywords:
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