| 编码鳜传染性脾肾坏死病毒结构蛋白新基因ORF90.5L的鉴定分析 |
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| 引用本文： | 王庆,罗永文,刘春,曾伟伟,张超,石存斌,吴淑勤. 编码鳜传染性脾肾坏死病毒结构蛋白新基因ORF90.5L的鉴定分析[J]. 中国水产科学, 2010, 17(4) |
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| 作者姓名： | 王庆 罗永文 刘春 曾伟伟 张超 石存斌 吴淑勤 |
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| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东,广州,510380
2. 华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510640 |
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| 基金项目： | 农业部公益性行业科研专项资助，现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目 |
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| 摘 要： | 鳜传染性脾肾坏死病毒(Infectious spleen and kidhey necrosis virus,ISKNV)全基因组序列于2001年完成测定,全基因组为111 362 bp,含有124个推测的开放阅读框(ORF).21307年,Eaton等对12株已完成序列测定的虹彩病毒代表株进行分析比较,除了已经推测的ORF外,认为ISKNV基因组中还存在一个的核心基因(core gene)ORF90.5L.本研究以ISKNV的cDNA为模板,根据Eaton等报道中推测的上下游位点设计引物扩增出一段963 bp的PCR产物.该序列编码一个320个氨基酸的蛋白质,推测分子量为35 kD,含有预测的跨膜区,与虹彩病毒属(Iridovirus)其他成员编码的肉豆蔻基膜蛋白有较高的同源性.将该片段克隆到原核表达载体pET32a(+)中,纯化表达的重组蛋白pET90.5L免疫昆明鼠获得高效价多克隆抗体.利用抗pET90.5L抗体与纯化病毒进行免疫印迹,结果表明,抗pET90.5L的多抗可以特异性识别病毒粒子中大小约为35 kD的蛋白条带,ORF90.5L编码的蛋白应为病毒的结构蛋白.本研究旨在为ISKNV基因工程疫苗的研发和病源侵染机制研究提供基础参考.
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| 关 键 词： | 鳜传染性脾肾坏死病毒 核心基因 病毒结构蛋白 |
| 修稿时间： | 2010-07-22 |
Identification of a new gene ORF90.5L encoding putative virus structural protein of mandarin fish infectious spleen and kidney necrosis virus(ISKNV) |
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| WANG Qing,LUO Yongwen,LIU Chun,ZENG Weiwei,ZHANG Chao,SHI Cunbin,WU Shuqin. Identification of a new gene ORF90.5L encoding putative virus structural protein of mandarin fish infectious spleen and kidney necrosis virus(ISKNV)[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2010, 17(4) |
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| Authors: | WANG Qing LUO Yongwen LIU Chun ZENG Weiwei ZHANG Chao SHI Cunbin WU Shuqin |
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