pBI121-LyrZ-GFP表达载体的构建及其在和田苜蓿愈伤组织中的转化

将绿色荧光蛋白（GFP）基因片段插入到pBI121-Lyz多克隆区，构建了重组表达载体pBIl21-Lyz-GFP。经SmaⅠ与BamHⅠ双酶切和PCR验证重组质粒，均能得到约750bp的目的片段，通过进一步测序证明，GFP基因已成功地连接到pBI121-Lyz中，且重组质粒连接方向正确。利用冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌（Agrobacterium tumenfaciens ） LBA4404,，用叶盘法转化和田苜蓿（Medicago sativa L. cv. Xinjiang Daye），筛选出具有卡那霉素抗性的愈伤组织，经PCR扩增和荧光显微镜检测证明，重组基因已成功地转化到和田苜蓿愈伤组织中。