分子伴侣prsA2基因缺失对单增李斯特菌致病性的影响 |
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引用本文: | 胡文洁,方小伟,郭骞,杨雨婷,刘晶,梁雄燕,杨玉莹,方春.分子伴侣prsA2基因缺失对单增李斯特菌致病性的影响[J].中国畜牧兽医,2024(1):338-346. |
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作者姓名: | 胡文洁 方小伟 郭骞 杨雨婷 刘晶 梁雄燕 杨玉莹 方春 |
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作者单位: | 长江大学动物科学学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年基金项目(31802208);;湖北省教育厅科学技术研究项目(Q20221302); |
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摘 要: | 【目的】构建单增李斯特菌分子伴侣prsA2基因缺失株与回补株,探究其对单增李斯特菌内化素B(InlB)锚定能力以及致病性的影响。【方法】利用穿梭质粒pKSV7和回补质粒pIMK2分别构建prsA2基因缺失株与回补株;通过生长曲线分析亲本株10403S、缺失株ΔprsA2和回补株CΔprsA2生长能力;利用Western blotting检测prsA2基因缺失对单增李斯特菌InlB锚定的影响;通过肠上皮细胞(Caco-2)黏附侵袭试验与免疫荧光试验、小鼠毒力试验分析prsA2基因缺失对单增李斯特菌黏附侵袭能力、在宿主细胞间迁移能力及小鼠致病性的影响。【结果】PCR扩增结果显示,试验成功构建了缺失株ΔprsA2和回补株CΔprsA2。生长曲线结果显示,prsA2基因缺失不影响单增李斯特菌在BHI培养基中的生长能力(P>0.05)。Western blotting结果显示,缺失株ΔprsA2细菌表面的InlB锚定量极显著低于10403S和CΔprsA2(P<0.01),细菌培养上清中InlB锚定量极显著高于10403S和CΔprsA2(P<0.01)。细胞试验结果显示,缺失...
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关 键 词: | 单增李斯特菌 分子伴侣 prsA2基因 缺失 致病性 |
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