马铃薯Y病毒CP基因的原核表达及免疫金标试纸条的研制 |
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引用本文: | 乔开,赵锐佳,黄维依,蔡红.马铃薯Y病毒CP基因的原核表达及免疫金标试纸条的研制[J].植物检疫,2023(4):23-27. |
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作者姓名: | 乔开 赵锐佳 黄维依 蔡红 |
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作者单位: | 云南农业大学/云南省植物病理重点实验室 |
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摘 要: | 选取马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)代表株(NC_001616.1)外壳蛋白基因37~281区间,采用化学合成方法合成目标序列,将其连接到原核表达载体pET-32a(+),并转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达出45 kDa融合蛋白,回收后免疫日本大耳白兔制备抗血清。Western Blot分析多克隆抗体特异性良好,后制备25 nm胶体金,标记PVY CP37-281多克隆抗体,制备胶体金免疫层析试纸条。结果表明,试纸条能在15 min内检出PVY,PVY病株汁液检测稀释限度可达106倍(W/V),使用常见复合侵染烟草检测,未出现交叉反应。由此可知,该试纸条操作简便,反应灵敏特异,适用于田间一线及种薯生产中马铃薯Y病毒的检测。
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关 键 词: | 马铃薯Y病毒 外壳蛋白 免疫层析试纸条 |
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