清热凉血复方防治大肠杆菌对紧密连接ZO-1蛋白造成的损伤

为了探究清热凉血方对大肠杆菌体外抑菌效果以及对紧密连接ZO-1蛋白损伤的防治作用,采用倍比稀释法检测清热凉血方对大肠杆菌的直接抑菌作用;进一步使用清热凉血方预防或治疗处理猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术和免疫荧光染色法检测ZO-1的mRNA和蛋白的表达情况;最后使用硝酸铝显色法、硫氰化钾-三氯化铁法以及浓硫酸-苯酚法检测清热凉血方中有效活性成分的含量。抑菌结果显示,白头翁汤、牛角地黄汤、清瘟败毒饮抑菌作用最强,最小抑菌浓度(MIC)值为250 g/L;RT-qPCR结果显示,预防效果最好的是牛角地黄汤,治疗效果最好的是牛角地黄汤和清瘟败毒饮;而免疫荧光检测结果显示,预防效果最好的是白头翁汤、清营汤和清瘟败毒饮,治疗效果最好的是清瘟败毒饮;有效活性成分检测显示,白头翁汤的总黄酮和总酚酸含量最高,分别为120.75,58.11 mg/g;牛角地黄汤总多糖含量最高,为370.02 mg/g。综上,清热凉血方可以在体外直接抑制大肠杆菌,并对大肠杆菌造成的紧密连接ZO-1蛋白损伤有防治作用。除此之外,清热凉血方中含有多种有效活性成分。