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| 基于变异PEDV的S-N融合双基因蛋白IgA-ELISA抗体检测方法的建立及应用 | |
| 作者姓名： | 王隆柏 陈秋勇 曾宪煜 吴学敏 车勇良 陈如敬 周伦江 |
| 作者单位： | 1. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;2. 长汀县畜牧技术推广站 |
| 基金项目： | 福建省重大专项专题资助项目（2021NZ029023）;;福建省星火科技计划资助项目（2020S0002）; |
| 摘 要： | 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引发猪群腹泻的主要病原之一,给我国生猪养殖业造成了重大的经济损失。为建立IgA-ELISA抗体检测方法,本研究采用变异PEDV真核表达的S-N融合蛋白作为包被抗原,通过系列反应条件优化,建立了PEDV的IgA-ELISA抗体检测方法。该方法的最佳反应条件为包被抗原质量浓度2 mg/L,用5%BSA于37℃封闭2 h;将待检血清1∶50稀释于37℃作用1 h,加1∶20 000稀释酶标二抗于37℃作用30 min, TMB显色10 min;以D450 nm ≥0.326判定为阳性,当D450 nm ≤0.277判定为阴性,介于两者判定为可疑。检测猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒(PoRV)标准阳性血清抗体均为阴性,且重复性变异系数均低于10%。通过对我国福建地区304份样品(血清179份和乳汁125份)进行检测,并与商品试剂盒进行参照对比,总符合率达到93.2%以上,表明该试剂盒检测方法具有较高的特异性、敏感性和重复性,可用... |
| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 S-N蛋白 IgA-ELISA抗体检测方法 |