热吸水链霉菌抗原组分的分析

目的：农民肺（ｆａｒｍｅｒ′ｓｌｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ，ＦＬＤ）是由于反复吸入霉草粉尘引起的一种职业性，过敏性肺部疾病，也称外源性过敏性肺泡炎（ｅｘｔｒｉｎｓｉｃａｌｅｒｇｉｃａｌｖｅｏｌｉｔｉｓ，ＥＡＡ）。热吸水链霉菌是我国引起ＦＬＤ的主要病原之一，为了对ＦＬＤ的血清学诊断提供依据，应用免疫印迹技术对该菌的抗原组分与实验性ＦＬＤ家兔免疫血清的血清学反应进行了分析。方法：①热吸水链霉菌（ＳＴ）抗原的制备：热吸水链霉菌（Ｈ９－４株）由同济医科大学提供，将菌种接种于液体培养基５２℃振荡培养４ｄ，收集菌体反复冻融制成可溶性抗原，另将部分菌体干燥成粉状。②急性期ＦＬＤ动物模型的复制：取健康成年家兔１０只，模拟ＦＬＤ自然感染途径，以ＳＴ干菌粉让其自然吸入。复制前后，分别取静脉血作免疫印迹用。③ＳＤＳ－ＰＡＧＥ：电泳采用Ｌａｒｍａｌｉ不连续缓冲系统，进行垂直平板电泳。④免疫印迹：按照Ｔｏｗｂｉｎ所述的方法进行转移电泳，将凝胶上已分离的多肽转印到硝酸纤维素膜上。结果：①急性期ＦＬＤ动物模型１－６周血清ＩＢ试验的动态观察：吸入菌粉前，家兔血清与ＳＴ抗原的ＩＢ结果均为阴性，１周后，家兔血清即能与ＮＣ上的７３ＫＤ多肽反应，且以后