| 酵母单杂交文库构建及巨峰葡萄VvFT基因启动子上游调控因子筛选 |
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| 引用本文： | 黄桂媛,张瑛,林玲,韩佳宇,时晓芳,曹雄军,郭荣荣. 酵母单杂交文库构建及巨峰葡萄VvFT基因启动子上游调控因子筛选[J]. 南方农业学报, 2020, 51(12): 2875-2883. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2020.12.002 |
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| 作者姓名： | 黄桂媛 张瑛 林玲 韩佳宇 时晓芳 曹雄军 郭荣荣 |
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| 作者单位： | 广西农业科学院葡萄与葡萄酒研究所,南宁 530007 |
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| 基金项目： | 广西重点研发计划项目广西农业科学院基本科研业务专项广西自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | [目的]利用酵母单杂交文库筛选巨峰葡萄VvFT基因启动子上游调控因子,挖掘参与调控葡萄开花时间的因子,为揭示花期转变代谢通路和定向改良葡萄品种提供理论参考.[方法]利用PlantCARE分析预测VvFT基因启动子顺式作用元件,并以VvFT基因启动子为诱饵,利用酵母单杂交文库筛选技术,筛选作用在VvFT基因启动子上游的调控因子.[结果]葡萄VvFT基因启动子区域存在13种启动子顺式作用元件,包括A-box、CAAT-box和TATA-box组成型调控元件;光响应调控元件ATC-motif、Box 4、G-Box和GT1-motif;茉莉酸甲酯(MeJA)响应调控元件CGTCA-motif和TGACG-motif;干旱诱导的MYB结合位点元件MBS;玉米蛋白代谢必需的调控元件O2-site;参与生物钟控制的调控元件circadian;厌氧诱导必需调控元件ARE.以VvFT基因启动子为诱饵,筛选获得34条表达序列标签(EST),其中有21条为未知功能,有13条在植物生长、抗逆防御、信号转导、转录调控、蛋白酶等方面均有已知或预测的功能,包括转录抑制因子ft41、GRF1互作因子ft44、NAP1相关蛋白ft64及ft70分子伴侣DnaJ10.酵母单杂交点对点验证结果表明VvDnaJ10和VvFT基因启动子之间有相互作用.[结论]通过酵母单杂交文库筛选获取13条候选EST,虽然大部分EST功能预测分析结果与VvFT调控开花时间无明显的直接关系,但研究结果为进一步探索VvFT转录或表达水平控制葡萄开花时间的分子机制提供侯选基因.
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| 关 键 词： | 葡萄 VvFT基因 启动子 酵母单杂交文库 调控因子 筛选 |
Yeast one-hybrid library construction and screening of upstream regulators of VvFT promoter in kyoho grape |
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| HUANG Gui-yuan,ZHANG Ying,LIN Ling,HAN Jia-yu,SHI Xiao-fang,CAO Xiong-jun,GUO Rong-rong. Yeast one-hybrid library construction and screening of upstream regulators of VvFT promoter in kyoho grape[J]. Journal of Southern Agriculture, 2020, 51(12): 2875-2883. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2020.12.002 |
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| Authors: | HUANG Gui-yuan ZHANG Ying LIN Ling HAN Jia-yu SHI Xiao-fang CAO Xiong-jun GUO Rong-rong |
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