实时荧光LAMP法检测转基因猪的标记基因hCD3

利用ESE-Quant tube scanner监测平台,建立了一种基于实时荧光LAMP技术的hCD39基因快速检测方法。针对hCD39基因设计6条特异性引物,在63℃条件下,进行核酸扩增反应45 min。在扩增前加入SYBR GreenⅠ染料作为反应的指示剂,以SYBR GreenⅠ染料的荧光强度作为结果判定标准。该方法灵敏度高,最小可检测到3fg·μL-1;特异性好,与转基因猪中的标记基因hCD46、LEA29Y均无交叉反应;并且可对口腔拭子标本进行检测。因此,研究建立的实时荧光LAMP法,操作简单,反应快速,灵敏度高,特异性好,并且可以对猪活体进行无损伤采样检测,适合在现场快速简便的操作。