烟草黑胫病拮抗菌的筛选鉴定及其发酵工艺优化

【目的】为筛选出对烟草黑胫病具有拮抗作用的细菌菌株,为烟草黑胫病的生物防治及生物农药的开发提供理论依据。【方法】采用平板对峙法筛选对烟草黑胫病有明显抑制作用的细菌菌株,结合形态观察、生理生化特征及分子生物学特征对该菌株进行鉴定,并利用菌饼法对该菌株的培养工艺进行优化。【结果】筛选出的菌株D1为革兰氏阳性菌、短杆状、产孢,且生理生化特征及16S rRNA基因序列与解淀粉芽孢杆菌具有极高的相似性(97%),因此确认菌株D1为解淀粉芽孢杆菌。筛选的最优培养基为PD液体培养基,最优碳源为蔗糖、氮源为蛋白胨、无机盐为氯化钙,最优配比为蔗糖20%、蛋白胨10%和CaCl_2 10%;最佳培养条件为pH 7~8、培养时间42 h和装瓶量30%。【结论】筛选得到的目的菌株通过发酵培养对烟草黑胫病有明显的抑制作用,可作为生防菌开发利用。