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猪骨骼肌肌球蛋白轻链激酶单克隆抗体制备及鉴定
作者单位:;1.南京农业大学动物医学院;2.锦州医科大学畜牧兽医学院;3.辽宁省畜产品质量与安全工程重点实验室
摘    要:为制备猪骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(skMLCK)的特异性单克隆抗体,设计合成多肽并与载体蛋白偶联,经细胞融合、培养基筛选、阳性细胞的检测与单克隆化后,获得3株能稳定分泌抗skMLCK单克隆抗体的杂交瘤细胞株;种植BALB/c小鼠腹腔,收集腹水,纯化后得到skMLCK的单克隆抗体。分别应用高效液相色谱、质谱和Western blot对纯化单克隆抗体进行抗体纯度、效价和敏感性检测。结果显示:获得的猪skMLCK单克隆抗体,能特异性识别skMLCK纯化蛋白、猪肌肉组织的内源性蛋白。本试验成功制备了能特异性结合猪skMLCK的单克隆抗体,这为今后进一步研究探讨skMLCK对猪肌肉发育的影响提供物质基础。

关 键 词:  skMLCK  单克隆抗体  特异性

Preparation and identification of monoclonal antibody against porcine skeletal muscle myosin light chain kinase
Abstract:
Keywords:
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