重组牛IFN-γ蛋白单克隆抗体的制备

本研究以纯化原核表达重组蛋白rBovIFN-γ-PET28a-His为免疫原,以重组蛋白为筛选抗原,通过杂交瘤细胞技术,研制出5株稳定分泌rBovIFN-γ单克隆抗体的细胞株,命名为1C11、6E2、7F7、9F5、10C8;腹水效价分别为1∶12 800、1∶6 400、1∶12 800、1∶25 600、1∶12 800。5株单抗中:1C11、7F7、9F5、10C8只与rBovIFN-γ-PET28a-His反应,而不与IFN-α、IFN-β、IL-4、白介素2、鸡IFN-γ等其他细胞因子发生交叉反应;6E2除了与rBovIFN-γ-PET28a-His反应外,还与鸡IFN-γ发生交叉反应。Western blot分析表明,4株单抗均能特异性识别并结合rBovIFN-γ,纯化后的5株单抗的腹水效价分别为1∶6 400、1∶3 200、1∶6 400、1∶12 800、1∶6 400;同时,本研究制备的兔抗rHis-BoIFN-γ多抗效价达1∶25 600。