创伤弧菌微球口服疫苗的制备及其免疫效果研究

为了研究创伤弧菌灭活疫苗的免疫效果，本研究将实验室保存的创伤弧菌菌株EPL0201经0.3%甲醛灭活，采用海藻酸钠包裹灭活菌液制备了创伤弧菌微球疫苗，通过口服途径免疫健康的珍珠龙胆石斑鱼(Pearl gentian grouper)，在免疫后第28天用1×10⁷ cfu/mL创伤弧菌腹腔注射珍珠龙胆石斑鱼，检测了免疫后珍珠龙胆石斑鱼部分免疫相关基因的表达趋势和攻毒后的免疫保护率。创伤弧菌微球口服疫苗的粒径为(34.55±5.33)μm，包覆率为90.5%。测其安全性良好。实时定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)结果显示，与对照组相比，各免疫基因先后出现不同的表达变化。TLR信号通路上的基因TLR1、TLR2、TLR3、TLR5和M y D88及炎性细胞因子IL-1β、IL-12p40和TNF-α在肾脏、脾脏、肝脏和肠组织中都参与免疫应答。TGF-β只在脾脏中有表达。免疫基因在各个组织中的表达变化不同，其中，表达量最高的是IL-1β在脾脏中，最高值为对照组的72.37倍。同一种免疫基因在鱼体不同器官和组织中的峰值表达量...